【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A）的含量。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購(gòu)！

我司供應(yīng)種屬種類齊全：人、大小鼠、豬、雞、犬、猴、牛羊、雞鴨、藥殘類、植物、羊、豚鼠等。質(zhì)量可靠、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存。同時(shí)免費(fèi)提供產(chǎn)品最新報(bào)價(jià)、實(shí)驗(yàn)原理、產(chǎn)品用途及中英文說(shuō)明書(shū)。上海軒澤康生物擁有自己的實(shí)驗(yàn)室（上海）和技術(shù)團(tuán)隊(duì)，公司提供售前、售中、售后技術(shù)支持，為您解決實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題。想要了解更多實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)，歡迎咨詢!

檢測(cè)原理:  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A（SP-A）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AELISA試劑盒性能：

準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

靈敏度：zui低檢測(cè)濃度小于1.0pg/mL。

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白AELISA試劑盒組成及其配置：

（ELISA試劑盒檢測(cè)范圍等數(shù)據(jù)，因檢測(cè)樣本 的不同而調(diào)整，實(shí)際數(shù)據(jù)以隨貨說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。）

實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：

1.  儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。

2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

樣品收集、處理及保存：

【細(xì)胞培養(yǎng)上清】：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

【血清】：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。

【血漿】：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【體液】：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。

 【樣本要求】：樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

 【樣本保存】：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

關(guān)于做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題：

1. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能覆蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2. 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對(duì)低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn)，但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。

4. 做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng)，但一般來(lái)說(shuō)，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對(duì)于有些實(shí)驗(yàn)，至少要0.99甚至?xí)r0.999.

5. 樣品的濃度等指標(biāo)時(shí)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作時(shí)比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。

6. *采用倍比稀釋法配置標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。

ELISA檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì):

1.     上海軒澤康生物擁有自己的實(shí)驗(yàn)室和技術(shù)團(tuán)隊(duì)，公司免費(fèi)提供ELISA代測(cè)服務(wù)，并提供售前、售中、售后技術(shù)支持。為您解決實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題，如需了解更多上海軒澤康生物代測(cè)服務(wù)，請(qǐng)咨詢或聯(lián)系相關(guān)客服。

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