一. 樣品收集、處理及保存方法：人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

二. 自備物品：

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.  37℃恒溫箱

三. 人(ALT)酶活性檢測試劑盒 ELISA夾心法實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要，在加液后請輕輕晃動整個(gè)96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時(shí)請注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。

4） 檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

四. 檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被(ALT)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(ALT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

上海軒澤康生物有限公司的ELISA檢測試劑盒品質(zhì)高、曲線漂亮，并提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬、各種系列elisa科研實(shí)驗(yàn)檢測試劑盒，詳情可咨詢我司銷售人員或咨詢我司在線客服。ELISA檢測試劑盒代測服務(wù)內(nèi)容說明書：

1） 服務(wù)項(xiàng)目：間接法ELISA檢測

內(nèi)容說明：客戶提供檢測材料

結(jié)果周期：檢測試驗(yàn)報(bào)告 1周

2） 服務(wù)項(xiàng)目：夾心法ELISA檢測

內(nèi)容說明：客戶提供檢測材料

結(jié)果周期：檢測試驗(yàn)報(bào)告 1周

3） 服務(wù)項(xiàng)目：競爭法ELISA檢測

內(nèi)容說明：客戶提供檢測材料

結(jié)果周期：檢測試驗(yàn)報(bào)告 1周

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